Lub tshuab tsom kab hluav taws xob yog ib qho ntawm cov txuj ci siv hluav taws xob feem ntau pom hauv ntau cov kev tshawb fawb thiab chaw kuaj mob. Spectrophotometers yog siv rau kev tshawb fawb hauv physics, molecular biology, chemistry, thiab biochemistry lab. Feem ntau, lub npe hais txog Ultraviolet-Pom (UV-Vis) Spectroscopy.
Lub zog ntawm lub teeb yog nyob ntawm nws txoj kev nthwv dej, feem ntau xaiv raws li lambda. Txawm hais tias lub tshuab hluav taws xob nyob sab nraud nthuav dav dhau ntawm ntau yam ntau ntawm yoj mus ntev, feem ntau cov chaw soj nstuam tsuas yog ntsuas ib qho me me ntawm lawv. UV-Vis Spectroscopy ntsuas ntawm 200 txog 400 nanometers (nm) rau UV ntsuas lub teeb, thiab mus txog kwv yees li 750 nm hauv qhov pom kev pom.
Rau UV-Vis Spectroscopy, cov qauv feem ntau muaj thiab ntsuas hauv cov ntim me me hu ua cuvettes. Cov no tuaj yeem ua cov yas yog siv hauv qhov pom kev pom, tab sis yuav tsum yog quartz lossis fused silica yog siv rau kev ntsuas UV. Muaj qee cov tshuab uas siv tau cov iav coj mus kuaj.
Pom Spectroscopy feem ntau siv kev lag luam rau colorimetry. Siv cov qauv no, cov qauv ntsuas tau ntsuas ntawm ntau lub yoj ntawm 400-700 nm, thiab lawv cov ncauj lus ntawm kev nqus tau sib piv nrog tus qauv. Cov txheej txheem no nquag siv los ntawm textile thiab number case manufacturers. Lwm cov neeg siv lag luam ntawm UV-Vis Spectroscopy suav nrog chav kuaj ua haujlwm thiab luam ntawv.
Hauv kev tshawb fawb txog tsiaj txhu thiab tshuaj lom neeg, cov kev daws teeb meem feem ntau yog ntsuas los ntawm kev ntsuas lawv qhov ntsuas ntawm lub teeb nqus ntawm qhov yoj yoj. Ib qho nqi hu ua extinction coefficient yog siv los laij cov concentration ntawm cov sib txuas. Piv txwv li, cov chaw soj nstuam molecular biology siv cov koob thaij duab los ntsuas qhov ntau ntawm DNA lossis RNA cov qauv. Lawv qee zaum muaj cov thev naus laus zis hu ua NanoDrop ™ spectrophotometer uas siv qhov feem me me ntawm cov qauv piv nrog uas siv los ntawm cov koob tshuaj spectrophotometers.
Kom qhov kev txiav txim rau siv tau, cov qauv yuav tsum ua raws Txoj Cai Beer-Lambert. Qhov no yuav tsum tau hais tias qhov kev nqus yuav ncaj qha ncaj qha rau txoj kev ntev ntawm lub cuvette thiab qhov nqus ntawm cov compound. Muaj cov kab ntawm cov coefficin extinction muaj rau ntau, tab sis tsis yog txhua txhua, cov kab ke.
Ntau yam tshuaj lom neeg thiab cov tshuaj lom neeg hloov pauv hloov xim thaum lub sijhawm, thiab spectrophotometers zoo heev rau kev ntsuas cov kev hloov no. Piv txwv li, cov polyphenol oxidase enzymes uas ua rau txiv hmab txiv ntoo rau xim av oxidize kev daws teeb meem ntawm cov phenolic tebchaw, hloov cov kev daws teeb meem meej rau cov uas pom tseeb. Cov kev tawm tsam zoo li no tuaj yeem ntsuas los ntawm ntsuas qhov nce ntawm kev nqus ntxiv vim cov xim pauv. Qhov tsim nyog, tus nqi pauv yuav raug ua kab, thiab ib tus tuaj yeem suav tus nqi los ntawm cov ntaub ntawv no. Ib lub koob tshuaj tiv thaiv zoo dua yuav muaj qhov ntsuas kub uas tswj cov zaub mov kom sov los ua cov tshuaj tiv thaiv nyob rau qhov kub thiab txias zoo rau qhov enzyme.
Lub chaw soj nsteeg microbiological thiab molecular biology nquag siv lub koob thaij tsom ntsuas saib kev loj hlob ntawm kev coj noj coj ua ntawm cov kab mob. Cov DNA kev kuaj sim ua tau ntau nyob hauv cov kab mob, thiab cov kws tshawb nrhiav xav ntsuas qhov kev loj hlob theem ntawm cov kab lis kev cai kom paub thaum twg ua tiav qee cov txheej txheem. Lawv ntsuas qhov kev nqus, uas yog hu ua lub ntom ntom ntom ntom ntom ntom ntom ntom ntom (OD), ntawm lub tshuab tsom tsom. Ib qho tuaj yeem qhia tawm ntawm OD txawm hais tias tus kab mob tau koom nrog kev faib lossis seb lawv pib tuag.
Spectrophotometers siv lub teeb ci los ua lub teeb yoj ntawm cov duab hluav taws xob sib txig sib luag. Cov cuab yeej no tom qab kis tau txais ib txoj kab nqaim ntawm lub teeb, thiab lub spectrophotometer sib piv cov kev siv lub teeb txav mus los ntawm cov qauv mus rau qhov ntawd dhau ntawm cov kev sib txuas. Piv txwv li, yog tias ib qhov sib xyaw kom yaj nyob hauv ethanol, qhov kev siv yuav yog ethanol. Cov txiaj ntsig tshwm sim raws li qib ntawm kev nqus ntawm qhov sib txawv ntawm lawv. Qhov no qhia tau tias qhov kev nqus ntawm cov qauv txuas.
Cov laj thawj rau qhov kev nqus no yog vim tias ob tog ultraviolet thiab pom lub teeb muaj lub zog txaus los ua kom cov tshuaj muaj zog rau ntau lub zog. Qhov kev zoo siab no ua rau muaj ntau dua wavelength, uas pom thaum lub nqus tau npaj tawm tsam wavelength. Cov lwg me sib txawv lossis cov inorganic tebchaw nqus tau cov zog ntawm cov wavelengths sib txawv. Cov uas muaj qhov siab tshaj plaws nyob rau hauv qhov muag pom tau pom yog xim dhau los ntawm tib neeg lub qhov muag.
Kev daws cov kev sib txuas tuaj yeem pom meej, tab sis nqus tau nyob rau hauv UV ntau. Cov kev sib txuas zoo li no feem ntau muaj ob txoj hlua khi lossis cov nplhaib uas muaj ntxhiab. Qee lub sij hawm muaj ib los yog ntau qhov muaj peev xwm pom thaum cov qib ntawm kev nqus yog npaj tawm tsam wavelength. Yog tias muaj, qhov no tuaj yeem pab hauv kev txheeb xyuas ntawm qee cov tebchaw los ntawm kev sib piv cov duab ntawm cov phiaj xwm tiv thaiv cov npe ntawm cov phiaj xwm paub.
Muaj ob hom UV-Vis spectrophotometer tshuab, ib leeg-kab thiab ob chav nqaj. Cov no sib txawv hauv qhov lawv ntsuas kev siv lub teeb ntawm kev siv thiab ntsuas tus qauv. Lub tshuab ob tog nqaj hlau ntsuas ntsuas cov siv thiab ntsuas sib xyaw ua ke, thaum siv cov tshuab ci tshuab ib leeg ntsuas ua ntej thiab tom qab sib tw cov tshuab txuas ntxiv.